苦荞MT2基因的克隆及其对铜胁迫的响应

摘要：

金属硫蛋白(metallothioneins,MTs)是一类富含半胱氨酸的低分子量蛋白,在植物重金属耐受性中发挥重要的作用.本研究从苦荞(Fagopyrum tataricum)叶片中克隆了FtMT2基因(GenBank No.KY643823)并分析过表达FtMT2的大肠杆菌(Escherichia coli)对Cu2+的耐受性;利用基因组步移技术获得FtMT2的启动子序列并构建不同截短启动子的双荧光素酶报告载体,采用瞬时转化苦荞叶肉细胞原生质体研究FtMT2启动子对Cu2+的响应.结果表明,FtMT2的ORF长度为237 bp,其编码的氨基酸序列具有典型的MT2的特征,且与双子叶植物的MT2有较高的同源性.5'侧翼序列缺失的系列启动子截短体对Cu2+表现为不同的增强响应模式,响应强度分析显示,截短体包含的预测金属响应元件存在剂量效应.此外,FtMT2过表达的大肠杆菌对Cu2+的耐受性增加.以上结果表明,FtMT2在苦荞对Cu2+的响应及重金属的耐受性中发挥重要作用.FtMT2的克隆及其启动子的功能分析对于建立Cu2+污染的检测技术具有参考价值,同时为解析苦荞重金属抗性的内在机制提供了理论依据.

关键词：苦荞、金属硫蛋白(MTs)、启动子、重金属耐受性

所属期刊栏目：25

分类号：S517(禾谷类作物)

资助基金：国家自然科学基金30400282和31171606;西北农林科技大学基本科研业务费2452015214

在线出版日期：2017-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：874-883