稳定表达犬SLAM受体的Vero细胞系的建立与应用

摘要：

信号淋巴细胞活化分子是(Signaling lymphocyte activation molecule,SLAM)犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)和麻疹病毒(Measles virus,MV)等麻疹病毒属病毒的主要细胞受体,在病毒入侵细胞的过程中具有重要作用.为了构建稳定表达犬SLAM (dSLAM)受体的Vero细胞系,本研究将dSLAM基因克隆至真核表达质粒pCAGG-TK-neo中,在dSLAM基因3'端引入Flag标签序列作为分子标记,并在其下游引入9 nt的Linker序列、猪捷申病毒(Porcine teschovirus,PTV)2A基因以及红色荧光蛋白mCherry基因,构建了重组质粒pCAGG-dSLAMFlag-mCherry.用该重组质粒转染Vero细胞,经G418压力筛选、红色荧光蛋白表达及表达绿色荧光蛋白的重组CDV (r20/8-EGFP)感染鉴定后,筛选到稳定表达dSLAM的细胞系.CDV野生型分离株JL17感染试验结果显示,JL17株在第15代次的Vero-dSLAM细胞上可良好生长,而在Vero细胞上不能形成细胞病变.结果表明,Vero-dSLAM细胞可稳定表达dSLAM,为CDV野生型毒株的分离和致病机制研究奠定了基础.

关键词：信号淋巴细胞活化分子、Vero细胞、犬瘟热病毒、病毒分离

所属期刊栏目：39

分类号：S829.2(家畜)

资助基金：国家自然科学基金31472198

在线出版日期：2019-04-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：7-12