人胸腺肽β4基因在大肠杆菌中的克隆、表达、纯化及促血管生成生物活性研究

摘要：

目的:在大肠杆茵中克隆和表达人源胸腺肽(thymosi β4,TB4)基因并进行分离纯化及促血管生成生物活性鉴定.方法:人工设计TB4基因片段,其密码子为大肠杆茵所偏爱,将合成的寡核苷酸片段经分子克隆拼接成TB4基因片段,与pET28a(+)载体连接成重组表达质粒pET28a-TB4,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达带His6-Tag的融合蛋白His6-TB4,通过镍柱亲和层析纯化,采用SDS-PAGE分析鉴定,由CAM试验进行重组蛋白活性的生物活性鉴定.结果:经DNA序列分析鉴定,重组质粒pET28a-TB4构建成功,IPTG诱导后的融合蛋白His6-TB4在大肠杆菌中得到高效表达,并经一步镍柱亲和层析即获得纯化.CAM试验证明其有促进毛细血管生成的活性.结论:获得高效表达的、高纯度的His6-TB4融合蛋白,为TB4的进一步的功能分析和促血管生成生物活性研究奠定了基础.

关键词：人胸腺肽β4、表达、镍柱纯化、鸡胚尿囊膜实验

所属期刊栏目：26

分类号：Q786;R322.74(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2007-09-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：295-298