小鼠胚胎干细胞建系及GFP标记

摘要：

目的:为组织工程提供新型种子细胞,建立胚胎干(ES)细胞系.方法:取129/svj白色小鼠4.5 d的囊胚,分离囊胚的内细胞团(ICM)细胞;在条件培养液及小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)作铺层下,细胞扩增传代,碱性磷酸酶(AKP)染色及oct4、ssea-1等特异性抗体鉴定细胞,并将细胞注射至裸鼠皮下观察细胞在动物体内的生长变化.结果:细胞体外培养呈"巢状"生长,可以持续传代;AKP染色及oct4、ssea-1等特异性抗体免疫反应均阳性;裸鼠皮下注射的细胞发育生长为包含各胚层细胞成分的畸胎瘤.在此基础上以基因转染方法将细胞标记绿色荧光蛋白(GFP).结论:从小鼠ICM所分离的细胞为小鼠胚胎干细胞,且标记GFP的ES细胞在传代及形成胚体的过程中均能显示GFP,对将来组织构建的种子细胞起到示踪作用.

关键词：胚胎干细胞、细胞系、绿色荧光蛋白、小鼠

所属期刊栏目：22

分类号：Q813;R-332(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划1999054300

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：71-74，88