重组载体pLNCX/iNOS的构建及其在NIH3T3细胞中滴度的测定

摘要：

目的:构建重组质粒pLNCX/iNOS.方法:用PCR技术从pCMV/iNOS质粒中扩增出iNOS全长cDNA,与逆转录病毒pLNCX构建重组质粒pLNCX/iNOS;通过脂质体介导把重组质粒转染入包装细胞PA317中,经G418筛选出抗性克隆.通过NIH3T3细胞测定病毒滴度.结果:经过酶切分析和核苷酸序列分析鉴定重组质粒构建正确.G418筛选出16个抗性克隆,能稳定合成并分泌重组逆转录病毒颗粒.NIH3T3细胞测定病毒滴度为2.1×104CFUml-1.结论:逆转录病毒载体pLNCX可有效地介导iNOS的转染.

关键词：一氧化氮合酶、逆转录病毒、基因转染、聚合酶链反应

所属期刊栏目：21

分类号：Q781;Q782;Q784;Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：江苏省科技厅自然科学基金BK99126

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：137-139