毛果杨苯丙氨酸解氨酶活性比较及肉桂酸制备

摘要：

[目的]苯丙氨酸解氨酶(PAL)在苯丙烷代谢途径中具有重要作用,PtrPAL基因的挖掘、酶学性质分析和应用为毛果杨苯丙烷代谢途径的研究和肉桂酸(t-ca)合成提供参考.[方法]基于基因组注释信息,挖掘毛果杨PtrPAL基因,进行原核表达和酶学性质分析.以L-苯丙氨酸(L-Phe)为底物,通过全细胞催化合成t-ca.[结果]通过挖掘毛果杨基因组得到了5个PtrPAL基因,系统发育树分析表明其在进化上分为两组.PtrPAL3和Ptr-PAL4来自不同进化分支,选取其进行原核表达和酶学性质分析.镍柱纯化后的重组蛋白rePtrPAL3和rePtrPAL4最适温度分别是55℃和60℃,最适pH分别是8.5和8.0,比酶活分别为3.363和3.381 U/mg,且均具有微弱的酪氨酸解氨酶活力.重组蛋白的动力学分析表明,rePtrPAL3对L-Phe的亲和力更高.将rePtrPAL3应用于L-Phe脱氨生产t-ca,全细胞催化7h可产生104 mmol/L t-ca.[结论]具有不同转录特异性的两种rePtrPAL酶学性质接近,但rePtrPAL3表现出更高的催化效率,更适合用于t-ca的生物合成.而且,其产量高于文献报道的28 mmol/L水平,具有良好的应用潜力.

关键词：毛果杨、苯丙氨酸解氨酶、酶学性质、肉桂酸、原核表达

所属期刊栏目：44

分类号：Q814.9(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家重点研发计划;江苏省高等学校自然科学研究重大项目

在线出版日期：2020-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：97-104