茂原链霉菌谷氨酰胺转胺酶基因克隆、序列分析及原核表达

摘要：

以茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)的基因组DNA为模板,利用PCR的方法扩增出谷氨酰胺转胺酶(Transglutaminase,TGase)的完整基因片段.序列分析结果表明,该片段全长1 246 bp,包含一个完整的ORF,长度1 146 bp,编码395 aa,分子量为44kD左右.该基因的核酸序列及推导的氨基酸序列同已知微生物来源的若干TGase相比,序列相似性均很高,并且发现与酶催化活性有关的一些motif,如酰胺化位点等;在此基础上,又进一步对其二级结构进行分析并完成了TGase三维结构的建模.将编码TGase酶的基因片段插入到原核表达载体pQE30Xa中,并转化大肠杆菌(E coli JM109).SDS-PAGE结果表明,经IPTG诱导后该基因得到表达,表达产物的酶活为2.2U/mL.

关键词：茂原链霉菌、谷氨酰胺转胺酶、基因克隆、序列分析、表达

所属期刊栏目：42

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30470299;国家博士后基金0208003034;教育部博士点基金20030284044

在线出版日期：2008-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：88-95