牛乳中抗幽门螺杆菌特异性抗体的间接ELISA法的建立
目的 建立抗幽门螺杆菌(Hp)特异性抗体的ELISA检测方法,用于牛乳中抗Hp特异性抗体的检测.方法 超声Hp全菌抗原接种奶牛,按多克隆抗体制备技术制备牛抗Hp抗血清.用纯化牛IgG免疫家兔.制备兔抗牛IgG多克隆抗体.硫酸铵盐析,DEAE-32柱层析分别纯化牛与兔IgG.兔抗牛IgG以辣根过氧化物酶标记.用Hp全菌抗原包被反应板,建立间接ELISA法用于牛乳抗Hp抗体的检测.结果 建立的抗Hp间接ELISA法的最佳包被抗原量为1.47μg/孔,HRP-兔抗牛IgG 1∶600稀释,标准曲线方程为A=0.0124+0.3988 lnC,相关系数r=0.999 8,线性范围为1.8~145μg/ml,回收宰在86.4%~92.8%,变异系数为9.4%~12.3%.结论 初步建立牛乳中抗Hp抗体的间接ELISA测定法,可用于Hp免疫牛乳中抗Hp特异性IgG的检测.
幽门螺杆菌、免疫乳、间接ELISA
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R392.11;R573
河北省医学科学研究重点项目01118
2008-07-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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