SCN3A基因突变型表达载体的构建及HEK 293细胞中的表达

摘要：

目的 体外构建含有SCN3A基因mRNA片段的质粒pCMV6-XL4-SCN3A的突变体N302S(c.905A＞G),为进一步的功能研究奠定实验基础.方法 设计带突变位点的引物,以野生型质粒为模板进行定点诱变,构建突变质粒.质粒经扩增纯化后瞬时转染到HEK293细胞中,24 h后用RT-PCR方法验证目的基因的表达.结果 重组质粒经酶切鉴定及测序证实突变成功.突变质粒转入HEK293细胞系24 h后,RT-PCR可以检测到目的基因的表达.结论 本实验成功地构建了SCN3A 基因突变型真核表达载体pCMV6-XL4-SCN3A-N302S,并在基因水平上验证了能在HEK293 细胞中表达.

关键词：SCN3A、质粒、表达、RT-PCR

所属期刊栏目：45

分类号：R349(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：湖南省教育厅立项课题资助15C1206;衡阳市科技局课题资助2015KJ59

在线出版日期：2017-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：132-135