10.15972/j.cnki.43-1509/r.2015.05.003
梅毒螺旋体金属蛋白酶水解纤维蛋白原的活性研究
目的:研究梅毒螺旋体金属蛋白酶Tp0751对细胞外基质纤维蛋白原的水解能力,为深入研究TP的致病机制提供实验依据。方法采用两点法构建H198A突变型及H202A突变型Tp0751基因,分别构建野生型和突变型Tp0751原核载体进行诱导表达;体外实验检测Tp0751野生型Tp0751蛋白、H198A Tp0751突变型蛋白、H202ATp0751突变型蛋白对纤维蛋白原的降解活性。结果成功表达并纯化了野生型Tp0751蛋白、H198A Tp0751突变体蛋白、H202A Tp0751突变体蛋白,各蛋白相对分子量大小约为26kD;纤维蛋白原在与野生型Tp0751蛋白作用约24h后被完全水解;与 H198A Tp0751突变体蛋白作用约24 h 后部分水解,尚有部分未被降解;与H202A Tp0751突变体蛋白作用约24h后几乎不被水解。结论野生型Tp0751蛋白具有水解纤维蛋白原的作用;Tp0751蛋白水解纤维蛋白原的活性可能与金属蛋白酶HEXXH域相关,影响Tp0751蛋白对纤维蛋白原的降解的活性位点可能是202位的H而不是198位的H。
梅毒螺旋体、金属蛋白酶、Tp0751、水解活性
R377.1(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金81201331;湖南省自然科学基金重点项目11JJ4076;湖南省教育厅青年基金11B107
2015-10-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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