幽门螺杆菌尿素通道蛋白ureI基因真核表达载体的构建及表达

摘要：

目的 构建幽门螺杆菌(H.pylori) 尿素通道蛋白编码基因(ureI) 的真核表达重组载体,并在HeLa细胞中表达,为核酸疫苗的研制奠定基础.方法 以H.pylori SS1株基因组为模板,PCR扩增ureI目的 基因片段,定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)多克隆酶切位点中,构建重组载体pcDNA3.1(+)/ureI;通过酶切、PCR及测序鉴定,筛选阳性重组载体;脂质体法转染重组质粒入HeLa细胞,Western blot 检测其在HeLa细胞中的表达.结果 以H.pylori SS1株基因组DNA为模板扩增出特异的ureI基因片段,大小约585 bp;双酶切及测序鉴定证明成功构建了H.pylori真核表达重组载体pcDNA3.1(+)/ureI;该重组质粒能够在HeLa细胞中表达目的 蛋白.结论 成功构建了真核重组载体pcDNA3.1(+)/ureI,并能在HeLa细胞中表达.

关键词：幽门螺杆菌、尿素通道蛋白、表达

所属期刊栏目：38

分类号：R378.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：湖南省自然科学基金06JJ2093;湖南省教育厅青年基金08B067项目

在线出版日期：2010-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：155-158