人乳头瘤病毒16型E6蛋白真核表达载体的构建及表达

摘要：

目的 构建在哺乳动物细胞中表达的人乳头瘤病毒16型早期蛋白6真核表达载体pcDNA3.1(-)/E6,为研究HPV16 E6蛋白在细胞永生化作用中的机制奠定实验基础.方法 用聚合酶链反应(PCR)扩增E6基因.将PCR产物纯化后与pUCm-T载体连接,经蓝白斑筛选、双酶切鉴定及序列分析后,亚克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体中;阳性克隆经双酶切鉴定后转染RAW264.7巨噬细胞,Western blotting鉴定其在RAW264.7细胞中的表达.结果 重组载体经酶切、PCR及测序证明插入片断序列正确无误,转染RAW264.7细胞后可在细胞中表达HPV16 E6蛋白.结论 成功构建的HPV16 E6真核表达载体pcDNA3.1(-)/E6能在RAW264.7细胞中表达E6蛋白.

关键词：人乳头瘤病毒16型、早期蛋白6、真核表达

所属期刊栏目：34

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：湖南省教育厅科研项目02C391

在线出版日期：2006-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：505-508