梅毒螺旋体外膜蛋白Gpd在Hela细胞中的表达及鉴定

摘要：

目的构建梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白甘油磷酸二酯磷酸二酯酶基因(Gpd)的真核表达载体pcDNA3.1(+)-Gpd,鉴定其在Hela细胞的表达,为开展Tp DNA疫苗动物实验打下基础.方法用PCR从Tp Nichols株基因组中扩增Gpd基因,构建真核表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gpd,脂质体介导转染入Hela细胞,以免疫组化及Western -blot检测在Hela细胞中的表达.结果双酶切及DNA测序显示重组质粒含有1 059 bp的目的基因片段,读码框架正确,无突变.该重组质粒在Hela细胞能有效表达分子量为41 kDa的目的蛋白,重组蛋白能与梅毒螺旋体阳性血清反应.结论构建的质粒pcDNA3.1(+)-Gpd成功地在体外真核细胞中表达.

关键词：梅毒螺旋体、DNA 疫苗、Gpd 基因、真核表达

所属期刊栏目：33

分类号：R759.1;Q786(皮肤病学与性病学)

资助基金：湖南省教育厅重点研究项目002A008;湖南省卫生厅科研项目B2003-085

在线出版日期：2006-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：476-478,494