梅毒螺旋体外膜蛋白Gpd的基因型分析及其重组蛋白的免疫原性鉴定

摘要：

目的构建梅毒螺旋体（Treponema pallidum，Tp）外膜蛋白Gpd基因的原核表达载体，检测其表达产物的免疫原性，并比较梅毒螺旋体各菌株Gpd基因序列的同源度。方法　从Tp Nichols株基因组模板中PCR扩增Gpd基因，与 GenBank登录的序列做blast比较，定向克隆构建原核表达重组体pET28b(+)-Gpd，转入大肠杆菌ril表达菌，SDS-PAGE分析重组蛋白的表达，Western-blot检测重组蛋白的免疫原性。结果　载体上所连目的基因片段序列与GenBank登录的Nichols株Gpd基因序列完全一致,同其他病原性密螺旋体菌株登陆序列比较同源度为98%～100%。SDS-PAGE检测诱导产物显示有一Mr约为41 kDa的特异蛋白带，免疫印迹技术检测其能与梅毒阳性标准血清反应。结论　Tp原核表达重组体pET28b(+)-Gpd成功构建，且能够在ril表达菌中融合表达，为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了一定的实验基础。

关键词：梅毒螺旋体、Gpd基因、原核表达

所属期刊栏目：33

分类号：Q784(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖南省教育厅科研项目002A046;湖南省卫生厅科研项目B2003-085

在线出版日期：2005-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：29-32,36