高保真DNA聚合酶在SNP检测中的应用

摘要：

DNA测序技术,使人类步入了后基因时代;而后基因时代对DNA序列分析的新要求,尤其是有关单碱基多态性的检测,急需更高效和更特异的分析方法.作者介绍两种可靠性高且适应性广的单碱基多态性检测新方法.基于高保真DNA聚合酶对引物3′末端错配碱基的校正机制,通过标记引物3′末端,配对引物得到带标记信号的产物而不配对的引物则只能得到不含标记信号的产物.最近,我们新发现高保真DNA聚合酶具有通过聚合反应非成熟性终止以维持成熟性终产物保真度的能力.利用3′硫化磷酸修饰的引物,可强化由不配对引物所激发的对聚合反应的终止作用.3′硫化磷酸修饰与高保真DNA聚合酶共同形成一种由单碱基多态性调控的分子开关.这一新的分子开关可与电泳等多种现有的技术联合使用,在分析单一或多个已知SNP位点时,具有极大的应用价值.

关键词：硫化磷酸引物、三末端标记引物、单碱基多态性、高保真DNA聚合酶

所属期刊栏目：31

分类号：Q31(遗传与变异)

资助基金：国家自然科学基金30171084;国家重点基础研究发展计划973计划G2000056905

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：128-131,143