斑节对虾CDK2基因全长cDNA克隆及表达分析

摘要：

该研究以斑节对虾（ Penaeus monodon）cDNA文库中的CDK2片段为基础，利用RACE技术获得PmCDK2的cDNA全长，并利用生物信息学对其进行了分析。PmCDK2基因全长1679 bp，包括编码306个氨基酸的921 bp的开放阅读框（ ORF），258 bp的5＇UTR和500 bp的3＇UTR。同源性分析显示，PmCDK2与罗氏沼虾（ Macrobrachi-um rosenbergii）等物种的CDK2具有较高的同源性。使用荧光定量PCR技术研究了PmCDK2的mRNA在不同组织和卵巢发育各时期的相对表达量和变化模式，结果显示，PmCDK2在斑节对虾的脑、心、淋巴、肝胰腺、性腺等组织中均有表达，其中精巢中表达量显著高于其他组织；卵巢发育阶段表达分析则显示PmCDK2在Ⅲ期表达量最高，其次是Ⅳ期。通过原核表达技术成功获得了含有6个His标签的融合蛋白，并对融合蛋白进行 Western Blot试验，初步探讨了重组蛋白表达情况。结果表明，PmCDK2基因在斑节对虾卵巢发育过程中可能发挥了重要作用，该结果对进一步探究斑节对虾卵巢发育机理提供了一定的理论依据。

关键词：斑节对虾、CDK2、实时荧光定量PCR、原核表达、卵巢发育

分类号：S917(水产基础科学)

资助基金：国家自然科学基金项目31101903；广东省海洋渔业科技推广专项A201300B03；广东省科技计划项目2013B040402016；海南省应用技术研发与示范推广专项ZDXM2014057；中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金中国水产科学研究院南海水产研究所资助项目2014TS12

在线出版日期：2015-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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