合浦珠母贝DNA的抽提和RAPD反应体系的优化

摘要：

分别从保存于-70℃和95%乙醇的合浦珠母贝组织提取总DNA.结果表明,乙醇保存标本用双蒸馏水预处理后所提的DNA与-70℃保存的标本所提的DNA质量均较好.用抽提的DNA为模板优化RAPD条件,得到适合于合浦珠母贝的RAPD-PCR反应条件为:20 μL反应体系中包括20 ng DNA模板,1×PCR Buffer,0.1 mmol ·L-1dNTPs,2.5 mmol·L-1MgCl2,0.2 μmol·L-1引物,1 U Taq DNA聚合酶.最佳退火温度40℃.PCR产物用非变性PAGE-银染和琼脂糖-EB染色检测所得到的主要带型相同,但PAGE能检测到更多的多态带.

关键词：合浦珠母贝、DNA提取、RAPD条件优化、PAGE-银染

所属期刊栏目：2

分类号：Q781(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省科技厅科技计划2002B2150101;广东省自然科学基金037148

在线出版日期：2007-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：59-64