深黄被孢霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因在毕赤氏酵母SMD1168中表达的研究

摘要：

引物根据Δ6-脂肪酸脱氢酶(D6D)基因以及酵母蛋白表达载体pGAPZαA的多克隆位点进行引物设计,并在上游插入ECoR Ⅰ位点、下游插入Xho Ⅰ位点,从深黄被孢霉中克隆D6D基因,构建pMD18-T-D6D载体与pGAPZαA-D6D载体.将重组质粒线性化,并将其电转导入到毕赤氏酵母(Pichia pastoris SMD1168)中,Zeocin抗生素筛选高拷贝转化子,对重组菌进行诱导表达.经过Tricine-SDS-PAGE分析和蛋白质免疫印迹(Western bloting)试验,证明Δ6-脂肪酸脱氢酶融合蛋白具有免疫学活性.结果成功构建了重组酵母pGAPZα A-SMD1168,为利用基因工程菌生产γ-亚麻酸(GLA)奠定理论基础.

关键词：深黄被孢霉、Δ6-脂肪酸脱氢酶、毕赤氏酵母SMD1168、pGAPZαA表达载体

分类号：TS201.2(食品工业)

资助基金：黑龙江省农垦总局科技攻关项目HNK125A-04-16

在线出版日期：2016-10-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1-3,8