SDS-PAGE电泳法分析绿豆芽几丁质酶特性

摘要：

采用Sodium dodecyl sulfate (SDS)-几丁质-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-Chitin-PAGE)方法分析绿豆芽(子叶和下胚轴)几丁质酶的特性.在绿豆芽子叶和绿豆芽下胚轴中共检测到5个几丁质酶同工酶,分别将绿豆芽子叶中3个几丁质酶同工酶命名为CH-1,CH-2和CH-3,绿豆芽下胚轴的2个同工酶命名为CH-4和CH-5.对绿豆芽而言,在SDS-Chitin-PAGE前,样品缓冲溶液与样品蛋白粗提液混合的最适温度为24℃,时间为10 min.样品缓冲溶液中添加β-巯基乙醇会极大地降低绿豆芽(子叶和下胚轴)中几丁质酶同工酶活性.绿豆芽子叶中CH-1和CH-2,绿豆芽下胚轴中CH-4的耐受温度达80℃,绿豆芽子叶中CH-3,绿豆芽下胚轴中CH-5的耐受温度也可达到70℃.绿豆芽子叶中CH-1的最适pH值为4.0～4.4,CH-2在pH值4.0～8.0的活性变化不大,CH-3的最适pH值为4.4～5.2.绿豆芽下胚轴中CH-4的最适pH值为5.2～5.6,CH-5的最适pH值为4.4～5.2.

关键词：几丁质酶、绿豆芽、酶学特性、聚丙烯酰胺凝胶原位显示电泳

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金："863"计划项目"蔬菜绿色供应链技术创新与产品研制" 2008AA100803

在线出版日期：2013-09-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

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