高效电转化技术在噬菌体抗体库构建中的应用

摘要：

大肠杆菌的高效电转化技术是构建大容量噬菌体抗体库的关键技术,为了制备高转化效率的大肠杆菌TG1感受态细胞,采用电转化方法探索该菌在对数生长期的不同生长阶段、细胞浓度、噬菌粒DNA含量、电场强度对电转化效率的影响.实验结果表明,在菌株处于对数生长期的OD600值为0.5时,收集细胞制备感受态,感受态细胞浓度为4.0×1010细胞/mL,噬菌粒pCANTAB-ScFvAFB1浓度为100 pg/μL,电场强度为20 kV/cm,此时制备的大肠杆菌TG1感受态细胞的电转化效率可达2.13×109 cfu/μg DNA.研究结果表明,利用本实验确定的参数,可以制备出大肠杆菌TG1高效电转化感受态细胞,为大容量噬菌体抗体库的构建奠定了坚实的基础.

关键词：电转化、转化效率、噬菌体抗体库、库容量

分类号：Q813(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2010-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：43-46