视网膜内质网应激免疫组织化学抗体浓度选择的实验研究

摘要：

目的:探索小鼠视网膜色素变性(RP)模型视网膜内质网应激免疫组织化学(IHC)染色抗体的最适浓度,为研究RP发病机制及干预措施提供相应的指标检测方法.方法:给予清洁级健康雄性C57BL/6J小鼠腹腔注射N-甲基-N-亚硝基脲(MNU,60mg/kg)制备RP小鼠模型,造模后第7d行视网膜电图(ERG)检测和苏木精-伊红(HE)染色验证造模成功,摘取眼球并采用IHC染色法检测视网膜内质网应激相关蛋白(IRE1、ATF6、PERK、GRP78、Caspase-12)表达情况.结果:IRE1、ATF6、PERK、GRP78、Caspase-12蛋白均在RP小鼠视网膜呈阳性表达,IRE1抗体浓度为1:1000、ATF6抗体浓度为1:500和1:1000(此抗体两种浓度阳性表达无差异,P>0.05)、PERK抗体浓度为1:1500、GRP78抗体浓度为1:200、Caspase-12抗体浓度为1:100时,阳性表达强度适宜,且与各自其余抗体浓度相应蛋白阳性表达均有差异(P<0.05).结论:内质网应激相关蛋白抗体浓度IRE1为1:1000、ATF6为1:500和1:1000、PERK为1:1500、GRP78为1:200、Caspase-12为1:100时,其在小鼠RP模型视网膜IHC染色阳性表达程度较适宜.

关键词：视网膜色素变性、内质网应激、视网膜、小鼠、免疫组织化学染色

所属期刊栏目：23

分类号：R774.13;R363;R587.1

资助基金：中国人民解放军联勤保障部队第九00医院院内课题;福建省科技计划引导项目;福建省自然科学基金项目;中国人民解放军南京军区福州总医院博士后课题

在线出版日期：2023-02-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：32-38