基于 Nrf2 通道研究柚皮素磷脂复合物对氧化损伤ARPE-19细胞的保护作用

摘要：

目的:研究柚皮素(Nar)及其磷脂复合物( NPC)对叔丁基氢过氧化物( t-BHP)诱导产生的氧化损伤人视网膜色素上皮细胞( ARPE-19细胞)的保护作用及其作用机制.方法:根据文献最佳制作工艺制备NPC.将体外培养的ARPE-19细胞分为溶媒组(用DMSO培养) 、模型组(用200μmol/L t-BHP 干预) 、Nrf2-siRNA组(针对Nrf2基因进行细胞转染)、柚皮素组(200μmol/L柚皮素培养基预处理后加入200μmol/L t-BHP)、NPC组(200μmol/L NPC培养基预处理后加入200μmol/L t-BHP)、Nrf2-siRNA+柚皮素组(200μmol/L柚皮素预处理后Nrf2基因干扰,再加入200μmol/L t-BHP ) 、 Nrf2-siRNA+NPC 组( 200μmol/L NPC 预处理后 Nrf2 基因干扰, 再加入 200μmol/L t-BHP) .检测各组细胞内活性氧、丙二醛、超氧化物歧化酶、总抗氧化能力水平,分别采用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞内血红素加氧酶-1( HO-1) 、醌氧化还原酶-1 ( NQO-1) 、谷氨酸半胱氨酸连接酶( GCL)和核因子E2相关因子2( Nrf2)的表达水平.结果:NPC 较柚皮素能明显降低 ARPE-19 细胞内丙二醛、活性氧的含量,提高细胞内超氧化物歧化酶、总抗氧化能力水平.柚皮素和 NPC 预保护 ARPE-19 细胞后, Nrf2、HO-1、NQO-1和GCL mRNA的相对表达量和蛋白表达水平均较模型组和Nrf2-siRNA组升高.柚皮素组与NPC组,Nrf2-siRNA+柚皮素组与Nrf2-siRNA+NPC组细胞内4 种基因和蛋白相对表达水平均有差异. Nrf2-siRNA+柚皮素组与Nrf2-siRNA组Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白表达无显著差异. Nrf2-siRNA+NPC 组与Nrf2-siRNA组4种蛋白表达均有差异,NPC作用明显强于柚皮素.结论:柚皮素磷脂复合物能明显提高细胞内抗氧化能力,降低氧化水平,其通过激活Nrf2/ARE抗氧化应激通路上调Nrf2及其下游抗氧化酶和Ⅱ相解毒酶的表达对氧化损 伤的ARPE-19细胞起到更好的保护作用.

关键词：柚皮素、磷脂复合物、人视网膜色素上皮细胞、氧化损伤、核因子E2相关因子2

所属期刊栏目：21

分类号：R774.1;R363;R285.5

资助基金：无锡市卫生计生委科研项目No.MS201403

在线出版日期：2021-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1156-1161