高糖环境下内脏脂肪素在人视网膜色素上皮细胞中的作用

摘要：

目的:观察体外高糖诱导环境,对人视网膜色素上皮细胞中内脏脂肪素(Visfatin)的表达影响,以及研究高糖环境下重楼皂苷Ⅰ(PolyphyllinⅠ)对Visfatin表达情况的影响.方法:人视网膜色素上皮细胞培养后分3组,正常对照组、高糖组和高糖加PolyphyllinⅠ药物干预组,干预培养12h后进行检测.正常对照组:5.5mmol/L葡萄糖浓度常规培养;高糖组:将25mmol/L的高糖加入培养基建立模型;高糖加PolyphyllinⅠ药物干预组:高糖25mmol/L和3μg/L PolyphyllinⅠ药物加入培养基.免疫荧光染色法观察人视网膜色素上皮细胞中Visfatin和血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达;实时荧光定量PCR检测上皮细胞中Visfatin和VEGF mRNA的表达;Western-blot法检测上皮细胞中Visfatin和VEGF蛋白的表达.结果:免疫荧光检测发现Visfatin和VEGF在正常组视网膜色素上皮细胞中表达呈弱阳性.但在高糖组视网膜色素上皮中可见Visfatin和VEGF呈强阳性表达.药物干预组中Visfatin和VEGF荧光较高糖组明显减弱.RT-PCR显示高糖组Visfatin mRNA表达水平较正常组和干预组明显增高(t=4.24、3.89,均P<0.05).高糖组VEGF mRNA表达水平较正常组和干预组明显增高(t=3.53、2.57,均P<0.05).Western-blot结果示Visfatin蛋白水平,高葡萄糖组表达量显著高于正常对照组(t=3.62,P=0.01),干预组表达低于高糖组(t=3.79,P<0.01).结论:高糖环境可刺激视网膜色素上皮细胞中Visfatin的表达增加,PolyphyllinⅠ可抑制高糖环境下视网膜色素上皮细胞中Visfatin的表达,可能为治疗糖尿病视网膜病变提供新的思路.

关键词：内脏脂肪素、高糖、视网膜色素上皮细胞、血管内皮生长因子、重楼皂苷Ⅰ

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资助基金：内蒙古自治区自然科学基金项目No,2014MS0865,2017MS0804

在线出版日期：2020-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2028-2033