沉默GFAP基因调控高糖诱导的视网膜微血管内皮细胞增殖与凋亡

摘要：

目的:研究沉默胶质纤维酸性蛋白(GFAP)基因对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)增殖和凋亡的影响及其机制.方法:采用qRT-PCR法检测高糖(30mmol/mL)和低糖(5mmol/mL)处理的hRMECs中GFAP的表达.通过慢病毒介导法建立GFAP基因稳定沉默的高糖诱导的hRMECs细胞模型,用SRI-011381(TGF-β 信号通路特异性激活剂)、二甲基亚砜(DMSO)处理该细胞模型,采用Western blot法检测细胞中GFAP、转化生长因子-β1(TGF-β1)、转录激活因子2(Smad2)、Smad3蛋白的表达,并分别采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡.结果:高糖处理的hRMECs中GFAP表达水平显著升高.通过慢病毒介导法可成功构建GFAP基因沉默的高糖诱导的hRMECs细胞模型,且沉默GFAP后,细胞的增殖能力明显提高,凋亡率明显抑制,TGF-β 信号通路关键基因TGF-β1、Smad2、Smad3的蛋白表达均明显抑制,而激活TGF-β 信 号 通 路 可 逆 转 沉 默GFAP对 高 糖 诱 导 的hRMECs细胞的增殖促进和凋亡抑制作用.结论:沉默GFAP基因可促进高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞增殖,抑制细胞凋亡,其机制可能与TGF-β 信号通路失活相关.

关键词：胶质纤维酸性蛋白、高糖诱导的视网膜微血管内皮细胞、TGF-β 信号通路、增殖、凋亡

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在线出版日期：2020-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1871-1875