Mcc950对H2O2诱导的ARPE-19细胞炎性损伤的保护作用

摘要：

目的:探讨Mcc950对过氧化氢(H2O2)诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞)炎性损伤的保护作用.方法:将ARPE-19细胞分为正常对照组、H2O2损伤组、单纯Mcc950给药组、Mcc950预处理+H2O2损伤组,采用CCK-8法检测细胞活力并确定H2 O2和Mcc950合适的实验浓度,ELISA法检测细胞分泌的IL-1β 浓度,免疫印迹(Western blot)法检测细胞中NLRP3炎性小体相关蛋白的表达情况,TUNEL染色法观察细胞凋亡情况.结果:细胞活力随H2 O2刺激浓度的增加逐渐下降,H2O2浓度为400μmol/L时细胞活力显著降低;而0.1、1μmol/L Mcc950对细胞活力无显著影响,故选取400μmol/L H2O2和1μmol/L Mcc950作为合适的实验浓度.与正常对照组相比,H2O2损伤组细胞活力显著降低,细胞上清液中IL-1β 浓度显著升高,细胞凋亡率明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05),而与H2O2损伤组比较,Mcc950预处理+H2O2损伤组细胞活力明显升高,细胞上清液中IL-1β浓度和细胞凋亡率均降低,差异均有统计学意义(P<0.05).Western blot检测结果显示,H2O2能够促进细胞中NLRP3、Pro-caspase1和caspase1的表达,而Mcc950预处理+H2O2损伤组细胞中NLRP3、Pro-caspase1依然保持高表达,但caspase1表达水平得到明显抑制,表明Mcc950能有效抑制NLRP3炎性小体的激活从而干扰具有细胞凋亡作用的成熟caspase1的产生.结论:Mcc950能够有效抑制H2O2诱导的NLRP3炎性小体激活,恢复细胞活力,抑制细胞凋亡.

关键词：Mcc950、NLRP3炎性小体、人视网膜色素上皮细胞、IL-1β、年龄相关性黄斑变性

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在线出版日期：2018-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1583-1588