siRNA下调Mcl-1后奥沙利铂对人Y79细胞凋亡率的影响

摘要：

目的:研究siRNA下调Mcl-1后奥沙利铂对Y79凋亡率的影响.方法:使用RPMI1640培养液培养Y79细胞.将培养后的细胞用0.25μmol/L的奥沙利铂进行刺激,分别在6、16和24 h后,使用Western blot法对Mcl-1蛋白的表达效果进行检测.收集对数生长期的细胞,制备单细胞悬液,分别转染空质粒和Mcl-1-homo-991、Mcl-1-homo-1114、Mcl-1-homo-1235质粒.6 h后使用荧光显微镜拍照,观察转染效率,选出最佳的siRNA序列.将未进行转染操作的RB细胞Y79分为A组,将转染空质粒的为对照组,将行转染下调Mcl-1操作后的细胞分为B组和C组,其中A组和C组均采用0.25μmol/L的奥沙利铂进行刺激诱导处理,B组转染细胞常规培养,24h后采用Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞术进行检测对比4组的细胞凋亡率.结果:Western blot检测结果表明处理Y79细胞24 h后Mcl-1的表达最为显著,转染Mcl-1-homo-991质粒后能够明显抑制Y79细胞中Mcl-1的表达,转染效率最高.采用Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞术进行检测A组凋亡率(11.1%±1.2%)与对照组(6.1%±0.6%)对比,差异无统计学意义(P>0.05);C组Y79的凋亡率(49.2%±2.7%)显著高于B组(20.8%±1.9%),同时这两组的凋亡率都显著高于A组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:通过siRNA下调Mcl-1后,可以降低Y79的抗药性,从而增强奥沙利铂对Y79的凋亡,降低了Y79的存活.

关键词：视网膜母细胞瘤、奥沙利铂、Mcl-1、细胞凋亡

所属期刊栏目：17

分类号：R73;R45

在线出版日期：2017-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：2226-2228