缺氧对培养的人视网膜色素上皮细胞中NOX4表达的影响

摘要：

目的:观察缺氧对培养的人视网膜色素上皮细胞中NADPH氧化酶4(NOX4)表达的影响,探讨NADPH氧化酶与脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)形成的关系.方法:人视网膜色素上皮细胞(human retinal pigment epithelium,hRPE)体外常规培养和传代,取3～6代细胞用于实验.将培养的人RPE细胞分为常氧对照组和缺氧处理组,常氧对照组用DMEM完全培养液培养细胞,缺氧处理组培养液中含有终质量浓度为200μmoL/LCoCl2,分别观察缺氧后4、6、8、l2、24h后终止.采用细胞免疫荧光染色技术及Western-blot方法鉴定人RPE细胞中NOX4的表达以及缺氧不同时间对NOX4表达的影响.结果:常氧对照组及缺氧处理组人RPE细胞生长良好,形态呈梭形.缺氧处理组细胞的形态及排列方式与空白对照组相比无明显改变.免疫荧光染色显示,常氧对照组RPE细胞内有少量的NOX4表达,细胞质呈绿色荧光,细胞核呈蓝色荧光;缺氧处理后NOX4的表达量增加,一直持续到缺氧后期;Western-bolt显示缺氧条件下人RPE细胞中NOX4的表达明显增加,与缺氧时间呈正比,与常氧对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05):结论:NADPH氧化酶在人RPE细胞中有表达,缺氧条件下NOX4的表达显著提高,且与时间呈正比.提示NADPH氧化酶可能在脉络膜新生血管形成中发挥重要调节作用.

关键词：人视网膜色素上皮细胞、NADPH氧化酶4、脉络膜新生血管

所属期刊栏目：17

分类号：X7 ;P61

资助基金：陕西省自然科学基金项目No.2014JM2-8190Natural Science Foundation of Shaanxi 2014JM2-8190

在线出版日期：2017-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：34-37