10.3980/j.issn.1672-5123.2014.08.05
ELOVL4基因过表达对 n3和 n6超长链多不饱和脂肪酸生物合成效率的影响
目的:ELOVL4是常染色体显性Stargardt氏黄斑变性的致病基因,ELOVL4蛋白酶参与n3和n6超长链多不饱和脂肪酸( very long chain polyunsaturated fatty acid,VLC-PUFA)的合成,比较两者的生物合成效率,对治疗Stargardt氏黄斑变性有指导意义。<br> 方法:构建携带ELOVL4基因和绿色荧光蛋白的重组腺病毒,转入培养的PC12细胞,将细胞分成三组:PC12、PC12+Ad-GFP 和 PC12+Ad-ELOVL4,前两组为对照组,通过qRT-PCR定量分析 ELOVL4基因的表达量, Western Blot检测 ELOVL4蛋白的表达;等浓度(1:1)加入 EPA ( n3 PUFA)和AA(n6 PUFA),孵育48h之后进行脂肪酸提取,通过气相色谱-质谱法(gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)分析超长链脂肪酸的成分。<br> 结果:GC-MS检测到分别用EPA和AA处理后的PC12+Ad-ELOVL4的细胞中有n3 VLC-PUFA的表达,34:5 n3和36:5n3是20:5n3/EPA的主要产物,分别为0.71%和1.6%;34:4 n6和36:4 n6是20:4 n6/AA的主要产物,分别为0.46%和0.61%;EPA所产生的n3 VLC-PUFAs总和是AA所产生的n6 VLC-PUFAs总和的2倍。<br> 结论:在ELOVL4蛋白作用下,EPA合成VLC-PUFAs的效率高于AA,饮食中给予适当比例的n3/n6 PUFAs,可能是治疗STGD3疾病的方式之一。
二十碳五烯酸、花生四烯酸、ELOVL4基因、Stargardt病、超长链多不和脂肪酸
R73;O62
2014-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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