光损伤鼠视网膜片培养上清液诱导 MSCs 分化为视网膜样细胞的研究

摘要：

目的：应用大鼠视网膜片光损伤后的培养上清液，在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞（ mesenchymal stem cells ， MSCs）成为视网膜样细胞的可能性。<br>　　方法：贴壁筛选法分离、培养大鼠MSCs ，流式细胞仪对其细胞纯度鉴定。取材大鼠视网膜神经上皮层作为视网膜片，常规石蜡切片HE染色鉴定各层组织完整性。电镜观察大鼠视网膜片光损伤程度。制备3种诱导分化大鼠MSCs的条件培养液。3种条件培养液均培养诱导至第3代大鼠MSCs 7～8d，用RT-PCR检测视紫红质（Rhodopsin）、神经元特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）、胶质纤维酸性蛋白（ glial fibrillary acidic protein ，GFAP）等视网膜细胞标志物在诱导后细胞中的表达情况。<br>　　结果：HE染色显示大鼠视网膜片取材结构完整，电镜显示大鼠视网膜片光损伤后结构损伤严重。 RT-PCR鉴定：条件培养液诱导大鼠MSCs 7～8d，条件培养液Ⅰ组Rhodopsin （0．3915±0．00644）、NSE （0．2019±0．00682）、GFAP （0.1972±0．00211），条件培养液Ⅱ组Rhodopsin（0．0983±0．00319）、NSE （0．1048±0．00323）、GFAP （0．1040±0.00254），条件培养液Ⅲ组Rhodopsin（0．0044±0．00126）、NSE（0．0498±0．00149）、GFAP（0．0467±0．00333），组间差异有统计学意义。<br>　　结论：光损伤大鼠视网膜片培养上清液可诱导大鼠MSCs分化为视网膜样细胞，为干细胞治疗视网膜变性疾病提供新思路。

关键词：MSCs、视网膜样细胞、光损伤、分化

分类号：R77;R73

资助基金：国家自然科学基金课题 No．81070715；中国卫生部科研基金课题 No．WKJ2008-2-61；福建省创新平台基金课题No．2010Y2003@@@@National Natural Science Foundation of China No．81070715； Ministry of Health Research Projects Funded Project， China No．WKJ2008-2-61； Innovative Platform Foundation of Fujian Province ， China 2010Y2003

在线出版日期：2014-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：394-398