慢病毒介导的TGFβ-R2shRNA抑制人LECs细胞TGFβ-R2的表达

摘要：

目的：观察转化生长因子β-R2特异性短发夹 RNA （ shRNA ）对人晶状体上皮细胞TGFβ-R2表达的影响。<br>　　方法：根据小干扰RNA （ siRNA ）的设计原则，针对转化生长因子β-受体2基因序列特征构建特异性 shRNA （ RNAi ）载体，与TGFβ-R2过表达载体共转染293 T细胞，经Western blot筛选出有效RNAi载体后，进行扩增、纯化、滴度测定，并转染培养的人LECs ， qPCR 检测TGFβ-R2 siRNA慢病毒载体对TGFβ-R2 mRNA表达的影响。<br>　　结果：经Western blot 筛选，TGFβ-R2/GV115RNAi＃1对目的基因的表达敲减效果最明显，慢病毒包装，滴度为8E＋8 TU/mL，感染人LECs细胞后，对TGFβ-R2基因有显著的敲减效果，达到78．1％（P＜0．05）。<br>　　结论：TGFβ-R2 RNAi载体构建成功，并且能抑制人晶状体上皮细胞TGFβ-R2 mRNA的表达。

关键词：人晶状体上皮细胞、TGFβ-R2、小干扰RNA

分类号：S85;R37

资助基金：上海市卫生局青年科研项目No．2009Y126@@@@Shanghai Municipal Health Bureau Youth Projects 2009Y126

在线出版日期：2014-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：9-12