兔角膜基质中核黄素含量测定的HPLC方法建立

摘要：

目的:建立兔角膜基质中核黄素含量测定的高效液相色谱(high performance liquid chromatograph,HPLC)分析方法,并分析其专属性、灵敏度和准确性.方法:兔角膜组织匀浆经加热孵育和10%三氯乙酸去蛋白后离心,组织上清液经C18-SPE柱固相萃取后检测.高效液相色谱柱选择ODS-BP色谱柱(5μm,250mm×4 6mm ID),以甲醇-纯水(体积比为2:3)为流动相,pH=7.0,流速:0.1mL/min;荧光检测器激发波长425nm,发射波长525nm.结果:核黄素在1.0×10-6～1.0×10-4mg/mL范围与峰面积呈现良好的线性关系(r2=0.999 584),精密度结果显示:RSD=0.86%(n=10),样品溶液在24h内稳定性RSD=0.51%,测得的角膜样品核黄素加标平均回收率为99.3%,RSD为3.7%.结论:本实验中建立的样品前处理方法简单,HPLC方法专属性强、灵敏度高、准确性好,可作为紫外线A/核黄素角膜胶原交联法中角膜基质内核黄素含量测定的定量方法.

关键词：HPLC、核黄素、角膜、胶原交联、回收率

所属期刊栏目：13

分类号：R96;R31

在线出版日期：2013-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：49-51