使用PCR检测角膜绿脓杆菌

摘要：

目的:确定一个种特异性的实时聚合酶链反应(PCR)法检测绿脓杆菌(PA),一个可能提供给其他细菌病原体通用目标的用于PA的次一级目标DNA,并验证这种用于诊断测试的检测方法.方法:利用已知PA的角膜炎株建立对ecfX PA基因和16S rRNA基因的PCR检测.两个实验的结果参数是"检测限"(LOD),扩增效率(AE)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)扩增产物分析.两种检测方法通过对20例PA DNA阳性的真阳性临床标本和20例不含有PA DNA的真阴性样品的检测进行了验证.描述性统计和PAGE分析用作为结果参数.结果:通过ecfX检测的AE为96.6%,而LOD为每微升33.6目标DNA拷贝.16S rRNA检测的AE为103.4%,而LOD为每微升8.12拷贝.ecfX和16S rRNA 检测的敏感性,特异性,阳性预测值,阴性预测值,效率分别为(75%,95%,94%,79%和85%),及(70%,100%,100%,77%和85%).这两种PCR方法经过了验证,通过了PAGE分析的DNA图谱确认.结论:这里描述的PCR方法可能是对PA角膜炎标准诊断方法的一种有用的辅助检测.

关键词：绿脓杆菌、角膜、实时聚合酶链反应、ecfX、16S、rRNA

所属期刊栏目：11

分类号：R73;R57

资助基金：The Pennsylvania Lions Club and The Charles T. Campbell Foundation.A core grant for Vision Research NIH EY008098 provided expertise within the molecular module,and Research to Prevent Blindness has provided continued support of the ophthalmology department 美国宾夕法尼亚州Lions Club and The Charles T.Campbell Foundation资助项目

在线出版日期：2011-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1125-1131