人角膜内皮细胞体外氧化损伤及黄酮抗氧化保护作用的机制
目的:揭示黄酮对人角膜内皮细胞(human corneal endothe-lial cells,HCEC)的抗氧化保护作用及其机制.方法:利用HCEC的体外培养体系,采用形态观察,吖啶橙/溴化乙锭荧光双染色和DNA琼脂糖凝胶电泳等技术手段研究了黄酮和/或过氧化氢(H2O2)处理对HCEC细胞凋亡的影响,使用酶联免疫吸附试验分别对70μmol/L黄酮和/或600μmol/L H2O2处理不同时间后HCEC中凋亡诱导因子(AIF)与细胞色素C(CytC)的浓度变化进行了检测.结果:在600μmol/L H2O2处理8h,细胞凋亡率约为60%的HCEC氧化损伤模型中,70μmol/L黄酮预处理30min可使HCEC的细胞凋亡率降至约8%,而仅用黄酮处理组HCEC的细胞凋亡率约为1%.HCEC的总CytC浓度于H2O2处理3h后达到峰值(约为对照组的7.97倍),总AIF浓度于处理6h后达到峰值(约为对照组的1.28倍),而黄酮预处理组和仅用黄酮处理组HCEC的总CytC和AIF浓度与阴性对照组没有显著差异.结论:H2O2诱发HCEC凋亡是促使线粒体中CytC和AIF的外流引起的;70μmol/L黄酮对600μmol/L H2O2所致HCEC细胞凋亡具有很强的抗氧化保护作用.
人角膜内皮细胞、过氧化氢、黄酮、细胞凋亡、抗氧化保护作用
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TP2;R32
中国国家"十五"863项目资助2001AA625050;"十一五"863项目资助2006AA02A132
2008-10-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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