Müller细胞对大鼠视网膜微血管内皮细胞增生和迁移的影响

摘要：

目的:用免疫磁珠法原代培养大鼠视网膜微血管内皮细胞(RMEC),观察共培养Müler细胞对视网膜微血管内皮细胞增生和迁移的影响.方法:采用免疫磁珠的细胞分选法分离大鼠视网膜微血管内皮细胞,在条件培养基中培养生长,采用第Ⅷ因子抗体免疫组化染色方法鉴定细胞,采用流式细胞术和台盼兰染色分析传代中的微血管内皮细胞纯度以及细胞活性.传统的方法培养并鉴定Müler细胞.采用不同孔径微孔滤膜培养小室,进行大鼠视网膜微血管内皮细胞与Müler细胞分离共培养,对照组培养环境中无Müler细胞.以细胞曲线描绘反映细胞增生,并用流式细胞仪测定细胞周期.相差显微镜下计算穿过微孔滤膜迁移贴附于背面的内皮细胞数量.结果:通过磁珠分离方法获得了纯度为97.13%大鼠视网膜微血管内皮细胞,细胞活力达92%,第Ⅷ因子抗体染色呈阳性.与Müler细胞共培养的RMEC可早于正常培养2～3d进入生长平台期.RMEC中S期和G2期比例增加,G1期比例相对减少.S、G2和G1期百分比,在共培养组24h分别为44.0%,11.2%和44.8%,48h分别为42.3%,10.9%和46.8%;对照培养组24h分别为41.3%,4.9%和53.8%,48h分别为40.1%,4.7%和55.2%.迁移的细胞数增加,共培养6h移行至膜下的内皮细胞数12.2±2.5个,12h为51.7±23.4个,对照培养6h移行至膜下的内皮细胞3.3±2.5个,12h为14.7±7.0个,6h和12h两组内皮细胞数差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:免疫磁珠细胞分选方法可以获得高纯度的大鼠视网膜微血管内皮细胞,且对细胞活力无影响.Müler细胞可以促进视网膜内皮细胞的迁移,促进该细胞的增生.

关键词：视网膜、胶质细胞、微血管内皮细胞、增生、迁移、磁珠

所属期刊栏目：6

分类号：R77(眼科学)

在线出版日期：2006-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：345-351