体外内层血视网膜屏障模型中Müller胶质细胞对紧密连接的影响

摘要：

目的:建立体外内层血视网膜屏障(iBRB)模型并研究视网膜Müler胶质细胞(RMGC)对紧密连接(TJ)的影响.方法:采用免疫磁珠方法原代纯化和培养大鼠视网膜微血管内皮细胞(RMEC),采用改良酶消化方法培养RMGC,RMEC和RMGC在微孔膜的两侧共培养建立iBRB模型,通过相差显微镜和透射电子显微镜(TEM)观察两种细胞的生长和TJ的形态.采用跨内皮细胞电阻(TER)测量和TJ相关蛋白ZO-1荧光染色和蛋白电泳来评价TJ的变化情况.结果:RMEC和RMGC均可在膜上正常生长,RMGC间紧密连接.TEM观察高TER值样品中相邻RMEC形成典型的TJ结构.RMEC层TER在8d时达到最高,为(86.3±7.9)Ω·cm2,此后保持相对稳定.在RMGC存在的共培养组TER 7d时为(97.6±3.6) Ω·cm2,约为7d时RMEC组的2倍,8d达到峰值(113.5±5.3)Ω·cm2.在iBRB模型发展过程中,ZO-1的表达强度随时间延长而增加.结论:通过RMEC和RMGC的共培养可以建立体外iBRB模型,RMGC加快RMEC间的TJ成熟.

关键词：视网膜、胶质细胞、微血管内皮细胞

所属期刊栏目：6

分类号：R77(眼科学)

在线出版日期：2006-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：311-316