二甲基亚砜和乙醇对深低温冷冻保存兔角膜的保护作用的比较

摘要：

目的验证二甲基亚砜(DMSO)是否是目前最好的角膜冷冻保护剂;乙醇可否替代DMSO用于角膜的深低温冷冻保存.方法将16只新鲜兔角膜随机分为DMSO组和乙醇组两组.将角膜于4℃分别浸入浓度递增的两组保护液中,冷平衡1Omin后,将标本瓶置于自制的控速降温器中,按1.5～2°C/min的速度降温至-30℃后,再以5℃/min的速度降温至-80℃,然后,将标本瓶投入液氮中冷冻保存角膜5d,取出后置于50℃流动的热水中复温.然后将角膜片取出,浸入5mL的250g/L白蛋白溶液中脱去保护剂.每组各取6只角膜,用5mL林格氏液漂洗3次.将角膜内皮朝上置于凹形角膜台上,滴入2.5g/L锥兰染色,再用林格氏液漂洗后,用2g/L茜素红(pH=5.5)染色,再漂洗3次.将角膜置于载玻片上,用光学显微镜计数并计算每只角膜平均内皮细胞存活率(ESR).每组余下的2只角膜,用林格氏液漂洗后,置于25g/L戊二醛溶液中,分别用扫描电镜和透射电镜观察内皮细胞超微结构.结果DMSO组和乙醇组平均ESR分别为96.2%±2.5%和92.6%±6.2%,两组有显著性差别(P＜0.05).扫描电镜下,DMSO组角膜内皮细胞呈六角形,细胞完整似新鲜角膜,细胞间隙稍宽.乙醇组角膜内皮亦呈六角形,但细胞间隙明显增宽,局部区域可见胞膜破裂及细胞缺损.透射电镜结果显示两组角膜内皮细胞均有线粒体肿胀,内质网扩张及胞质内空泡形成,但乙醇组改变更明显.结论本实验研究提示乙醇的冷冻保护作用不如DMSO.

关键词：角膜、低温保存、显微镜检查

所属期刊栏目：2

分类号：R77(眼科学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：34-36