可溶性PyNPase的分离与纯化

摘要：

本实验对重组PyNPase基因工程茵诱导表达,超声波破碎后上清液进行了分离与纯化,采用革兰氏染色法观察和活茵计数法检测破碎效率.超声波破碎上清液经Ni-亲和层析进行分离纯化,最后用SDS-PAGE和磷酸化反应进行了鉴定.结果表明,高效表达的PyNPase重组茵,在工作5 s,间歇5 s,工作50 min,破碎效率最佳.SDS-PAGE检测电泳纯度达到85%以上,条带模糊;分离获得的PyNPabe能使尿苷磷酸化为尿嘧啶,具有磷酸化酶活性,但上清液中可溶性PyNPRSe的含量比较低.

关键词：嘧啶核苷磷酸化酶、超声波法、分离纯化、磷酸化酶活性

所属期刊栏目：27

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：60-64