小麦TaHTAS-5A基因的克隆、表达分析及亚细胞定位

摘要：

非生物胁迫对小麦的生长发育具有不良影响,克隆与非生物胁迫相关的基因,并对其结构及表达特性进行分析,可以为进一步探索小麦的抗逆机制和抗逆育种奠定基础.本研究利用同源克隆技术从普通小麦品种中国春中克隆了水稻E3泛素连接酶基因OsHTAS的同源基因TaHTAS-5A(GeneBank登录号:MF967573),并利用生物信息学方法对其基因序列特征进行分析;利用qRT-PCR技术对该基因在小麦不同组织及不同逆境胁迫下的表达模式进行分析;同时,对该基因的表达产物进行了亚细胞定位.结果表明,小麦TaHTAS-5A基因含有220 bp的5'UTR、1242 bp的ORF以及126 bp的3'UTR,共编码413个氨基酸;基因组分析表明,该基因全长3 819 bp,共包含4个外显子和3个内含子;缺体-四体定位表明该基因位于小麦5A染色体上;蛋白结构分析显示,TaHTAS-SA蛋白的N端包含四个跨膜结构域,C端包含一个E3泛素连接酶特有的RING finger保守结构城,具有植物E3泛素连接酶的结构特征;qRT-PCR结果显示,TaHTAS-5A对高温、低温和ABA都有响应,对干旱和盐响应不敏感;TaHTAS-5A在小麦的根、茎、叶和幼穗等不同组织中均有表达,但表达量有差异,在叶和穗中的表达量明显高于根部和茎部;亚细胞定位结果表明,TaHTAS-5A位于细胞膜上.本研究为进一步探究小麦TaHTAS-5A基因的功能奠定了基础,也为小麦非生物胁迫抗性改良提供了一定的理论依据.

关键词：小麦、TaHTAS-5A、非生物胁迫、表达分析、亚细胞定位

所属期刊栏目：38

分类号：S512.1;S330(禾谷类作物)

资助基金：国家重点研发计划项目2017YFD0100704;农业部高产转基因小麦新品种培育科技重大专项2016ZX08002003;杨凌示范区产学研用协同创新重大项目2016CXY-01

在线出版日期：2019-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1137-1145