10.7606/j.issn.1009-1041.2017.04.06
病毒诱导的全新tae-miR9663的沉默影响叶片发育和籽粒大小
MicroRNA(miRNA)是一类长度为18~24 nt的非编码小分子RNA,参与植物各种发育进程.tae-miR9663是新发现的在小麦幼苗、旗叶和籽粒中高表达的miRNA,但其生物学功能未知.为了探索tae-miR9663的功能,通过人工合成tae-miR9663的小串联模拟靶标(short tandem target mimic,STTM),将其构建到大麦条斑花叶病毒(barley stripe mosaic virus,BSMV)载体上,利用病毒介导的基因沉默(virus-inducinggene silencing,VIGS)技术转染小麦宁春16五叶一心期的第5片叶,转染20 d后观察叶片表型并取旗叶进行实时定量PCR,成熟时观察种子大小.叶片表型观察结果表明,与BSMV:00相比,接种BSMV:STTM-tae-miR9663的9株幼苗中出现4种叶片表型,即第6片叶有白点或白条纹,旗叶(第7片叶)有白点或白条纹,第6片叶边缘有锯齿状,旗叶叶尖处有皱缩.实时定量PCR分析结果表明,STTM-tae-miR9663过表达植株的tae-miR9663表达丰度下降,说明BSMV-VIGS技术可通过过表达STTM有效地沉默内源miRNA.成熟种子大小观察结果表明,与BSMV:00比较,接种BSMV:STTM-tae-miR9663的植株种子的长和宽均减小.
小麦、tae-miR9663、STTM、病毒诱导的基因沉默(VIGS)技术
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S512.1;S336(禾谷类作物)
国家自然科学基金青年基金项目31501295;国家自然科学基金面上项目31471482
2017-05-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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