冬小麦叶片抗旱蛋白质组双向电泳技术体系的优化

摘要：

为给小麦抗旱蛋白质组学研究提供技术支撑,以两个抗旱性不同的冬小麦品种周麦18和晋麦47三叶期幼苗为材料,比较分析了PEG胁迫处理后两种不同蛋白质提取方法TCA/丙酮法和磷酸钠缓冲液研磨法对IEF/SDS-PAGE双向电泳的影响,并在IPG胶条pH范围、蛋白质上样量和SDS-PAGE胶浓度等方面进行了探索与优化.结果表明,采用TCA/丙酮法提取叶片全蛋白,选用17cm、pH 4～7的IPG线性胶条,在上样量为150μg·胶条-1,以及12%SDS-PAGE胶浓度下进行双向凝胶电泳,蛋白质能够更好地被分离,2-DE图谱上可分辨出约400个蛋白点.利用该体系比较了PEG胁迫后两个品种双向电泳图谱的差异,周麦18有9个蛋白点存在差异,其中5个下调表达,4个上调表达(3个新诱导表达);晋麦47有5个蛋白点存在差异,均上调表达(1个新诱导表达).

关键词：小麦、PEG胁迫、蛋白提取方法、双向电泳、差异表达蛋白

所属期刊栏目：31

分类号：S512.1+1;S312(禾谷类作物)

资助基金：国家863计划项目2006AA100201

在线出版日期：2016-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：443-449