小麦RAPD分析中温度循环参数的优化

摘要：

为了解决小麦材料RAPD分析中的重复性差、多态性低等问题,对反应中的温度循环参数进行了优化研究.通过比较不同变性时间、复性温度和升温速度等的扩增效果,设计出了适于小麦RAPD分析的PCR程序:94℃预变性5 min;开始的5 个循环为94℃ 1 min,38℃ 1 min,0.3℃/s升温,72℃ 2 min;后40个循环为94℃ 10 s, 38℃ 1 min,0.3℃/s升温,72℃ 2 min;最后72℃ 5 min.在后40个循环中用1～2 s的变性时间,则能够有目的地扩增600 bp左右及以下片段.利用该程序,每条引物检测的位点数平均达17.6个左右,高于一般报道的1～10个.该程序在小麦遗传多样性研究、分子标记鉴定等方面有较高的实用价值.

关键词：小麦、RAPD、优化

所属期刊栏目：21

分类号：S512.1;S336(禾谷类作物)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划101-02-01-01

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1-4