基于重测序鉴定GbTMEM214基因在陆地棉基因组的插入位点

摘要：

[目的]利用农杆菌介导法获得了转GbTMEM214基因陆地棉品系,旨在明确转基因棉花株系中T-DNA插入位点的序列特征及检测方法,为其生物安全评价提供依据.[方法]基于基因组重测序技术,利用BLASTn将测序数据与陆地棉TM-1基因组序列进行比对分析,设计特异性引物通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)验证插入位点.[结果]携带目标基因GbTMEM214的T-DNA整合在陆地棉基因组D13号染色体57 019 068～57 019 106bp,T-DNA插入导致受体基因组37 bp的片段缺失;通过PCR扩增获得携带GbTMEM214基因的T-DNA插入位点的侧翼序列,由此建立了转GbTMEM214基因棉花的特异性检测方法.[结论]基于基因组重测序技术获得了转GbTMEM214基因棉花的T-DNA插入位点及侧翼序列信息,可为转基因棉花的生物安全评价提供技术参考.

关键词：转基因棉花、GbTMEM214、重测序、插入位点、侧翼序列

所属期刊栏目：36

分类号：S858.28;S562;R329.24

资助基金：农业生物育种重大项目;国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2024-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：285-295