双抗夹心酶免疫法检测转Bt基因抗虫棉种子的研究

摘要：

应用中国农业大学化控中心筛选的抗Bt Cry1Ac蛋白鼠单克隆抗体和兔多克隆抗体,建立了Bt Cry1Ac蛋白的双抗夹心酶联免疫检测法(Sandwich ELISA).该方法的检测范围为0.78～50.0 ng· g-1,线性回归方程y=0.6634x-1.7387,决定系数为0.992.该方法与国外商业化试剂盒检测结果完全一致,可用于转基因抗虫棉Bt毒蛋白定性和定量检测.采用所建立的方法对亲本之一为非转基因抗虫棉的杂交F1、F2种子进行检测,结果F1全部为阳性,F2阴性和阳性数量比为1∶3,符合性状分离定律；此外,模拟检测种子的偶然基因改造成分混杂(Adventitious Presence,AP)检测结果为:对于Bt毒蛋白含量在140 ng以上的单粒种子,最低检测比例为1∶110.

关键词：转Bt抗虫棉、双抗夹心酶免疫法、种子纯度、偶然基因改造成分混杂

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分类号：S562.035.3(经济作物)

资助基金：转基因生物新品种培育重大专项2009ZX08012-017B;国家自然科学基金31271649

在线出版日期：2013-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：45-50