抗转Bt基因棉棉铃虫幼虫中肠氨肽酶N基因的克隆与序列特征

摘要：

通过对抗性和敏感棉铃虫中肠氨肽酶的克隆和测序,鉴定了氨肽酶基因家族的2个成员:Haapn3和Haapn4,其cDNA序列具有3053和2862个核苷酸,分别具有3045和2853 bp的开放阅读框,编码产生1014和951个氨基酸的蛋白质.其推定氨基酸序列均具有锌结合模体HEXXH和所有锌依赖氨肽酶共有的序列GA-MEN.N-末端分别具有18和20个氨基酸的疏水性信号肽,C-末端均具有21个氨基酸的GPI添加信号肽.比对抗性和敏感棉铃虫cDNA的开放阅读框,在Haapn3的开放阅读框中,抗性品系的cDNA具有25个核苷酸的不同,其中9个碱基替代造成氨基酸的变化:苏氨酸189→天冬酰胺、甘氨酸222→天冬氨酸、赖氨酸231→精氨酸、谷氨酸250→丙氨酸、异亮氨酸275→缬氨酸、天冬酰胺281→天冬氨酸、酪氨酸302→组氨酸、缬氨酸648→异亮氨酸、脯氨酸975→谷氨酰胺,其它16个碱基替代为无义突变.在Haapn4的开放阅读框中,有15个点突变,其中8个突变为无义突变,其它7个导致了氨基酸的改变,即赖氨酸4→天冬酰胺、组氨酸162→酪氨酸、脯氨酸185→丝氨酸、谷氨酸297→甘氨酸、苯丙氨酸385→丝氨酸、甲硫氨酸450→异亮氨酸、缬氨酸630→异亮氨酸.本文报道的氨肽酶4个cDNA序列已提交GenBank,AY279536和AY279537分别是抗性和敏感品系的Haapn3,AF511038和AY279534分别是抗性和敏感品系的Haapn4.

关键词：棉铃虫、转Bt基因棉花、抗性、氨肽酶、基因克隆

所属期刊栏目：16

分类号：S435.622(病虫害及其防治)

资助基金：高等学校博士学科点专项科研项目2000030703;国家自然科学基金30270889

在线出版日期：2005-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：13-20