10.3969/j.issn.1000-8101.2013.04.020
不同化学类型樟树叶片总RNA提取方法比较
采用SDS/酸酚法、Trizol试剂法、常规CTAB法及改良的CTAB法,分别提取5种化学类型樟树叶片总RNA,并对提取效果进行了比较分析.结果表明:Trizol法难以提取樟树叶片总RNA,得率很低;SDS/酸酚法和常规CTAB法得到的RNA存在DNA污染,富含蛋白、多糖、多酚等杂质;这3种方法均不适于富含多糖多酚类物质的樟树叶片总RNA的提取.改良的CTAB法能够提取得到樟树5种化学类型叶片总RNA,且在操作过程中,异樟比油樟和脑樟更易提取.此法能有效去除多糖和蛋白,提取得到的RNA 28S和18S rRNA条带清晰,OD260/OD280值为2.0左右,平均产率分别为115.8 μg/g FW.经RT-PCR检测,所得总RNA质量高、完整性好、成功率高,可以满足下一步实验的要求,可作为樟树叶片总RNA提取的首选方法.
樟树、化学类型、RNA提取、CTAB法、RT-PCR
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R44;X14
江西省科技支撑项目20112BBF60043;江西省科技支撑项目20113BEA27008
2013-09-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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