Smad3基因敲除对5/6肾切除慢性肾脏纤维化小鼠模型的影响

摘要：

目的 观察Smad3基因敲除对5/6肾切除慢性肾纤维化小鼠模型的影响.方法 清洁级WT-C57及Smad3-KO(以下简写S3-KO)小鼠各24只,分为假手术野生组(SWT)、假手术Smad3-KO组(SS3-KO)和模型野生组(MWT)、模型Smad3-KO组(MS3-KO)4组,模型组以platt法建立慢性肾脏纤维化模型,造模后4周,检测各组小鼠血中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24h尿蛋白(U-Pro/24h)含量、病理形态学变化;免疫荧光染色法观察肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅰ型胶原蛋白(Collagel),纤维连接蛋白(FN)的表达面积变化;蛋白免疫印迹法(WB)和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测各组小鼠肾组织TGF-β1、p-Smad3、α-SMA、CollageⅠ、FN蛋白及mRNA的表达水平;免疫组化法观察肾组织内中性粒细胞阳性表达个数的变化.结果 与假手术组比较,MWT组P-smad3蛋白,Smad3mRNA明显增高(P＜0.01),MS3-KO组虽有增高,但无显著性差异(P＞0.05).HE染色SWT,SS3-KO组肾小球形态基本正常,天狼星染色肾组织间质无或有少许红色胶原纤维沉积.MWT,MS3-KO组肾小球明显异常,天狼星染色MWT,MS3-KO组间质能够见到明显的胶原纤维,MS3-KO组病理改变总体轻于MWT组.经过图像处理分析可见,胶原纤维面积MS3-KO组面积小于MWT组,组间比较均有显著性差异(P＜0.05).指标方面,SWT与SS3-KO组比较,α-SMA、CollageⅠ、FN 免疫荧光面积,Scr、Bun、U-Pro/24h 水平,TGF-β1、α-SMA、CollageⅠ、FN 蛋白和 mRNA 相对表达水平,中性粒细胞阳性表达个数均无显著性差异(P＞0.05),M组与其S组比较上述指标含量明显增高(P＜0.01或P＜0.05),而MS3-KO与MWT比较,MWT组上述指标上升更为明显,组间差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).结论 Smad3-KO能够减少模型组小鼠肾组织TGF-β1、α-SMA、FN、CollageⅠ蛋白和mRNA的表达,改善肾功能,减少中性粒细胞的表达,能够减轻模型所致的肾脏纤维化病理损害,对肾脏损害有一定的保护作用.

关键词：Smad3基因敲除、5/6肾切除、慢性肾脏纤维化

所属期刊栏目：50

分类号：R285(中药学)

资助基金：国家自然科学基金81373615

在线出版日期：2023-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：189-194,后插6-后插7