miR-505靶向调控HMGB1逆转肝癌细胞阿霉素耐药

摘要：

目的 观察miR-505对阿霉素(ADM)耐药肝癌细胞耐药性及HMGB1表达的影响并探讨其机制.方法 采用药物浓度递增法建立肝癌细胞MHCC97阿霉素耐药细胞株MHCC97/ADM即为耐药组,培养48 h肝癌亲本细胞为MHCC97亲本细胞组;以MTT法检测MHCC97亲本细胞组及耐药细胞组(MHCC97/ADM细胞)的存活率及半数抑制浓度(IC50),检测MHCC97亲本细胞及耐药细胞miR-505、HMGB1表达差异.对耐药细胞(MHCC97/ADM细胞)给予miR-505拟似剂及miR-505抑制剂转染,以上调或下调miR-505表达,qRT-PCR检测转染效率;与阴性对照组(不进行转染的细胞)比较,MTT法及流式细胞术观察miR-505表达水平对ADM耐药MHCC97细胞生存、IC50及凋亡的影响,以双荧光素酶实验检测miR-505与HMGB1靶向调控关系.结果 随着ADM浓度的升高,亲本细胞株细胞存活率降低,抑制率升高,MHCC97细胞株的IC50值为(1.25±0.13)mM,耐药细胞株的IC50值为(41.78±5.41)mM,耐药指数(RI)为33.25.与MHCC97亲本细胞比较,MHCC97耐药细胞miR-505表达下调,HMGB1 mRNA及蛋白表达上调(P<0.05);上调miR-505表达,MH-CC97/ADM存活率降低,与阴性对照组比较,IC50降至(23.05±3.88)mM,RI降至17.24.下调miR-505表达,MHCC97/ADM存活率升高,IC50升至(80.28±11.34)mM,RI升至64.22(P<0.05);在MHCC97/ADM细胞组,与阴性对照组比较,上调miR-505表达,HMGB1mRNA及蛋白表达下降,下调miR-505表达,HMGB1mRNA及蛋白表达上调(P<0.05).上调miR-505表达逆转MHCC97/ADM的耐药性,增加耐药细胞株凋亡率.在HMGB1的3′端存在miR-505的结合位点.结论 上调miR-505表达通过负向调控HMGB1表达部分逆转肝癌细胞ADM耐药.

关键词：miR-505、耐药指数、阿霉素、肝细胞癌、凋亡

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资助基金：辽宁省自然科学基金20180550440

在线出版日期：2022-04-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：193-199