10.14053/j.cnki.ppcr.202003013
海南某三甲医院多重耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM表达及与耐药表型的关系研究
目的 探讨多重耐药铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM的表达及其与耐药表型的关系.方法 选取2016年9月至2018年10月儋州市人民医院微生物培养室分离的Pa 54株,采用琼脂稀释法测定14种抗菌药物的MIC,加外排泵抑制剂苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺(PA βN)进行干预实验,实时荧光定量PCR检测膜融合蛋白mexA、mexC、mexE、mexX的mRNA表达水平,以判断MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM的表达情况,PCR扩增调控基因mexR、nfxB、mexT、mexZ对扩增产物进行测序,使用Blast软件在GenBank上与已知序列进行比对.结果 RT-PCR检测发现,耐药菌株中18株(33.33%) Pa高表达MexAB-OprM外排系统,9株(16.67%)高表达MexCD-OprJ外排系统,12株(22.22%)高表达MexEF-OprN外排系统,14株(25.93%)高表达MexXY-OprM外排系统.抑制剂作用下18株MexAB-OprM外排泵高表达Pa株对头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星的MIC为2~64 μg/ml,9株MexCD-OprJ高表达株中6株对头孢噻肟的敏感性MIC为2~128 mg/ml,12株MexEF-OprN中对环丙沙星、亚胺培南的敏感性MIC为4~128 mg/ml,14株MexXY-OprM为庆大霉素、环丙沙星高度耐药菌株.分别随机选择mexA、mexC、mexE、mexX高表达菌株中的4个菌株,mexR高表达菌株中发生3个mexR基因突变;4个nfxB高表达菌株中均发生82位的突变;4个mexT高表达菌株中均发生26位的突变;2个mexZ高表达菌株发生138位的突变,1个发生50位的突变.结论 主动外排系统MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM过度表达是Pa多重耐药机制之一,同时与其调控基因mexR、nfxB、mexT、mexZ发生突变相关.
多重耐药铜绿假单胞菌、MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM
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海南省医药卫生科研项目1421000320A2004
2020-06-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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