MicroRNA-30a-5p靶向Beclin1抑制自噬减轻牛胆酸钠诱导的胰腺泡细胞损伤

摘要：

目的 探究微小型RNA-30a-5p(MicroRNA-30a-5p,miR-30a-5p)对胰腺泡细胞损伤的影响及作用机制.方法 不同浓度牛胆酸钠诱导AR42J细胞损伤,取最佳用药浓度,建立胰腺泡损伤模型.细胞分为Control组、Model组、mimic mock组及miR-30a-5p mimic组,牛胆酸钠及miR-30a-5p mimic处理细胞后,RT-PCR检测miR-30a-5p mRNA水平,MTT检测细胞存活,Hoechst检测细胞凋亡,试剂盒检测脂肪酶及淀粉酶活性,ELISA检测多种炎症因子的浓度,免疫印记检测自噬相关蛋白及PI3 K/AKT/m TOR信号通路相关蛋白的表达.生物信息预测miR-30a-5p和Beclin1的靶向关系,通过荧光素酶报告实验验证.pcDNA Beclin1(pc-Beclin1)及miR-30a-5p mimic转染经牛胆酸钠处理的AR42J细胞,检测细胞存活、凋亡、脂肪酶淀粉酶活性、自噬相关蛋白表达及炎症因子浓度.结果 500 μmol/L牛胆酸钠处理AR42J细胞.miR-30a-5p mimic可显著提高Model组AR42J细胞中miR-30a-5p的mRNA水平及细胞存活率,降低凋亡细胞百分比、脂肪酶淀粉酶活性及细胞培养上清中炎症因子的浓度.同时,miR-30a-5p mimic可显著降低Model组AR42J细胞中LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ比值及Beclin1表达,提高p62、p-P13K、p-Akt及p-mTOR表达.miR-30a-5p mimic显著降低Beclin1 wt的荧光酶活性.pc-Beclin1显著上调Beclin1,提高LC3表达,并显著减弱miR-30a-5p mimic对AR42J细胞的促增殖抗凋亡作用及对炎症反应的抑制作用.结论 miR-30a-5p通过靶向下调Beclin1,减轻牛胆酸钠诱导的胰腺泡细胞损伤.

关键词：miR-30a-5p、Beclin1、胰腺泡细胞损伤、自噬

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资助基金：陕西省中医管理局中医药科研课题15-LC064

在线出版日期：2019-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：684-692