竹叶总黄酮通过抑制Nox4减轻H2O2诱导的成骨细胞氧化损伤

摘要：

目的 探究抑制烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 (Nox4) 表达后竹叶总黄酮对H2O2诱导的成骨细胞氧化损伤的减轻作用.方法 M3T3-E1成骨细胞培养后分为5组, 正常组、损伤组、药物处理组、空白转染组、Nox4转染组.收集细胞上清液, 采用酶联免疫法测定超氧化物歧化酶 (SOD) 、乳酸脱氢酶 (LDH) 、丙二醛 (MDA) 含量, DCFH-DA荧光探针法检测活性氧 (ROS) 含量.钙结节染色、碱性磷酸酶 (ALP) 染色观察细胞成骨能力; MTT法检测M3T3-E1细胞活力;流式细胞仪检测M3T3-E1细胞凋亡情况; Western blot 检测Nox4蛋白的表达.结果 与正常组、药物处理组、NOX4转染组比较, 损伤组、空白转染组SOD含量降低, MDA、LDH、 ROS含量升高.ALP染色显示, 损伤组成骨细胞大量损伤, 数量明显减少, 药物处理组、NOX4转染组细胞损伤程度明显降低, 数量有所增加.茜红素染色显示, 损伤组细胞钙结节数量减少, 药物处理组、NOX4转染组细胞钙结节数量增多.与损伤组、空白转染组比较, 药物组、NOX4转染组ALP活性升高.MTT显示, 损伤组细胞活力明显降低, 药物处理组、NOX4转染组细胞活力升高.流式细胞仪结果显示, 损伤组、空白转染组细胞出现大量凋亡, 药物处理组、NOX4转染组凋亡程度较轻.Western blot 显示, 药物处理组、Nox4转染组M3T3-E1细胞Nox4蛋白相对表达量明显降低.结论 竹叶总黄酮对H2O2诱导的成骨细胞氧化损伤具有一定的保护作用, 其机制可能与抑制Nox4蛋白表达有关.

关键词：竹叶总黄酮、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4、成骨细胞MC3T3-E1、氧化损伤

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资助基金：河南省医学科技攻关计划项目 201505042

在线出版日期：2018-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：246-251